实验材料：小鼠肝脏

实验方法：使用GENFINE FMR201试剂盒提取小鼠肝脏总RNA，起始量：100 mg。100 μL RNase-Free ddH2O洗脱， 1%琼脂糖凝胶电泳，上样量5μL。

实验结果：使用FMR201试剂盒提取的样本RNA电泳主带清晰，浓度高，完整性好。

1、使用前需要包被培养瓶吗？

答：不需要，培养基中添加有促贴壁组分，可以有效地使细胞良好贴壁，不过使用预包被培养瓶不会对细胞生长有不利影响。

2、 建议细胞的接种密度是多少？

答：建议细胞的接种密度为8000cells/cm²。

3、为什么细胞融合度不可超过90%？

答：细胞生长过密，会出现接触抑制，继而细胞活性会受到影响，导致后续传代细胞生长缓慢或扩增倍数较低；并且产生接触抑制后ADSCs容易分化。

4、在MSC细胞培养的过程中，可不可以添加抗生素来预防细菌污染？

答：可以添加，但是如果是用于细胞治疗，添加抗生素会有致敏的风险。

5、有的文献中说接种SVF后12h进行换液，为什么你们的培养基要到48h换液？

答：SVF接种后，细胞贴壁需要一定的时间，12h时仍有许多细胞未贴壁，此时换液会造成细胞损失，贴壁细胞数量减少，所以不建议在此时换液；48h时细胞贴壁完全，此时换液不会造成贴壁细胞数量减少。

6、你们的培养基可以4℃存放多久？

答：间充质干细胞无血清培养基（脂肪—原代细胞分离及传代培养）分为基础培养基和添加剂，添加剂需-20℃冻存，配制成完全培养基后2～3周内用完；如用量不大，可将添加剂融化后分装，每次少量配制，避免添加剂反复冻融。切勿强光及紫外照射，每次使用前室温平衡30min，禁止水浴加热。